一、预构血管化神经的动物模型的建立（论文文献综述）
顾依然,朱仔燕,李春霖,邓国英[1]（2021）在《皮瓣实验动物模型的研究进展》文中研究表明随着显微外科技术的发展,皮瓣移植技术日益成熟。为了探究皮瓣的血供特点、提高皮瓣存活率以及提升显微外科技术,皮瓣动物模型被大量建立,旨在模拟临床应用时皮瓣在活体的生理状态。至今,已经建立了各种不同动物种类、部位和功能的皮瓣动物模型,具有各自的优缺点,然而对于皮瓣实验动物模型领域的整体情况缺乏一个全面的认识和总结。因此,下文旨在对皮瓣实验动物模型领域的研究进展做一综述。
文根[2]（2020）在《血管灌注量及位置对动脉化静脉皮瓣的早期成活的机制研究及临床应用》文中研究指明目的:动脉化静脉皮瓣是以皮下静脉网作为供血系统的特殊类型的组织瓣,具有供区选择范围大,供区损伤小,切取容易等优势。然而也存在静脉淤血、动脉血供不足、皮瓣部分或全部坏死等并发症。为提高动脉化静脉皮瓣的早期成活率,本课题探讨动脉灌注量及灌入位置对其影响,从而指导动脉化静脉皮瓣在临床中的应用。方法:第一部分:血管灌注量对动脉化静脉皮瓣早期成活及代谢影响的实验研究取48只新西兰兔随机分为实验组（36只）和对照组（12只）。对照组麻醉后画出皮瓣区域而不进行血管离断处理。实验组36只新西兰兔随机均分为三组（A/B/C）。首先,建立腹部动脉化静脉皮瓣动物模型:腹部正中设计一个10cm×10cm的动脉化静脉皮瓣,近心端边缘恰好低于双侧第一乳头连线的水平,远心端位于双侧腹股沟连线区域;皮瓣尾端掀起,皮瓣平面包括表皮,真皮,肉膜组织,于皮瓣远端分离右侧胸腹静脉后切断;分离右侧股动脉于膝关节平面结扎,近端向大腿根部游离,扭转后用8-0无损伤缝线与右侧胸腹静脉近端吻合。其次,A、B两组分别以直径1mm、1.5mm血管吻合器限制股动脉直径,以控制动脉血流灌注量,C组不使用血管吻合器。三组均仅保留皮瓣头端胸腹静脉完整以形成皮瓣流出血管,皮瓣游离完全后原位缝合。最后,术后即刻、术后3天以激光多普勒检测皮瓣血流相对值、术后3天取皮瓣局部组织分别测定水、蛋白、乳酸及葡萄糖含量。第二部分:血管灌入位置对动脉化静脉皮瓣早期成活及代谢影响的实验研究采用12只新西兰兔,每只兔子在腹部依前法设计腹部动脉化静脉皮瓣,再沿腹正中线将皮瓣均分为左、右两块皮瓣,每个皮瓣大小为10cm×5cm。分离双侧股动脉于膝关节平面结扎,股动脉近端向大腿根部游离,使用8-0无损伤缝线将股动脉近端与同侧胸腹静脉近端吻合,所有皮瓣均保留头端胸腹静脉完整以形成皮瓣流出血管。将24块皮瓣均分为两组:边缘蒂组（输入血管位于皮瓣边缘）12块（左右各6）和内部蒂组（输入血管位于皮瓣内部4cm）12块（左右各6）。每只动物两块皮瓣分别纳入边缘蒂组和内部蒂组。皮瓣游离完全后原位缝合。术后即刻、术后3天以激光多普勒检测皮瓣血流相对值、术后3天取皮瓣局部组织分别测定水、蛋白、乳酸及葡萄糖含量。第三部分:改善血管灌注量及位置对提高动脉化静脉皮瓣早期成活的初步临床应用研究根据前二部分的实验结果,在动脉化静脉皮瓣设计及受区血管选择方面进行了适当改进,应用于修复手足部皮肤软组织缺损12例。在不影响受区远端血供的情况下,尽量选取较粗大的动脉血管进行吻合;其二,静脉皮瓣中灌入动脉血的静脉向皮瓣内部适当游离。术后观察皮瓣存活情况。结果:第一部分:结果显示实验组与对照组相比皮瓣血流相对值、皮瓣水含量、葡萄糖含量、乳酸含量均低于对照组,两组间有统计学差异。通过血管吻合器直径控制血流灌注量,结果显示A、B两组与C相比血流量更小,水含量、葡萄糖含量低、乳酸含量高,两组之间亦有差别。第二部分:皮瓣灌注部位内部蒂与边缘蒂相比,血流量更大,葡萄糖含量更高,水含量及乳酸含量无明显差异。第三部分:12例动脉化静脉皮瓣都完成了重要组织结构的覆盖,10例皮瓣完全成活,2例皮瓣出现边缘部分坏死,经换药后好转。术后随访6-18月皮瓣色泽、质地与周围正常皮肤相似,外观满意,无挛缩。结论:通过新西兰兔腹部动脉化静脉皮瓣的动物实验研究发现,增加血管灌注量和内部灌入均能有效提高静脉皮瓣血流量及改善代谢状态,有利于皮瓣的早期成活;将此实验发现应用于手足部皮肤缺损修复的临床应用中,取得了较好的临床效果。
陈达[3]（2020）在《兔骨骼肌对大段自体骨异位预构血管化骨皮瓣的影响》文中认为背景随着社会的发展,各种由高能量创伤导致的开放性骨折在不断增加。开放性骨折发病率高,术后容易导致骨感染[1]。经过积极的清创处理虽然能控制感染,但会遗留大段（块）骨缺损伴皮肤软组织缺损。感染性骨缺损伴皮肤软组织损伤局部伤情复杂,一直以来都是骨科的难题[2]。当前主要的治疗方法,感染骨未能充分利用,治疗时间长,手术次数多,术后功能差[3-4]。采用自体骨皮瓣移植不需要经过缓慢的“爬行替代”过程,同时可以覆盖创面,填补组织缺损。但自体骨皮瓣的取材位置有限,难以满足各种类型的损伤,限制了它的应用和发展[5-6]。对皮瓣进行适当修饰改造可预构不同种类的组织皮瓣,使预构皮瓣能够修复各种类型的皮肤组织缺损[7-9]。临床中,将大段（块）自体骨异位寄养在肌肉内或者肌间隙,6-12个月后,大段（块）自骨可完成血管化[10]。骨骼肌可以在不添加任何外源种子细胞和因子的情况下使大段（块）骨血管生成和增加骨活性[11]。肌肉内富含大量的骨诱导型细胞群体,可以分泌多种与骨折愈合相关的细胞因子和生长因子。在预构骨皮瓣过程中,骨骼肌的血管生成与成骨作用鲜有报道,通过对骨骼肌的深入研究,为后期保障预构骨皮瓣成活,缩短预构骨皮瓣进程提供理论依据。目的探讨兔骨骼肌分泌血管内皮细胞生长因子（VEGF）、骨形成蛋白-2（BMP-2）规律以及对大段自体骨异位预构血管化骨皮瓣的影响。方法选取70只成年中国白兔,雌雄不限,随机挑选60只作为实验组,采用无菌手术的方法,截取左后肢胫骨中段1.5cm骨段,去除髓腔内及骨段表面附着软组织,高温水浴灭菌后将其置于右侧股直肌肌袋内预构骨皮瓣。剩余10只作为空白对照组。实验组于术后第2、4、6、8、10、12周各处死10只并取出大段自体骨及整块股直肌,大段自体骨大体标本观察、HE染色组织学检查、CD34及I型胶原蛋白免疫荧光染色检测血管化程度与骨活性,Western blotting检测股直肌肌组织中VEGF、BMP-2表达量。空白对照组仅截取白兔左后肢胫骨中段1.5cm骨段和右侧整块股直肌,检测指标同实验组。结果1大段自体骨大体观察结果实验组在预构骨皮瓣过程中,切口愈合良好,周围无炎性反应。大段自体骨髓腔两端和骨皮质表面粘附的纤维结缔组织逐渐增厚变多,与骨段贴附逐渐紧密;纤维结缔组织剥离后,骨表面可见骨吸收陷窝,并随着时间的延长凹陷变多加深,骨皮质也逐渐变薄。纤维结缔组织包裹骨段第8周开始与正常自体骨骨膜厚度,紧密程度相似,都较难分离。2大段自体骨HE染色结果实验组第2周骨表面及管腔极少见纤维肉芽组织;第4周时骨表面出现纤维肉芽组织,可见较小的腔隙,周围有少量新生血管和细胞成分。第6周可见更多的血管和细胞,血管旁骨表面骨旋涡排列规律可见分化成熟的骨细胞,哈弗管腔变大,骨小梁开始缓慢生长。实验组从第8周开始骨HE染色情况和新鲜胫骨HE染色相似,可见较多血管内皮细胞和骨细胞,以及致密成熟的骨小梁。3大段自体骨免疫荧光检测结果CD34免疫荧光结果显示:实验组CD34阳性血管数量总体呈先上升后缓慢降低,第8周时CD34阳性血管数量最多。实验组第4周时CD34阳性血管数量多于其第2周,差异显着（P<0.05）;实验组第6周CD34阳性血管数量多于其第4周,差异明显（P<0.05）;实验组第8周CD34阳性血管数量多于第6周,差异较明显（P<0.05）。对照组CD34阳性血管数量多于实验组第2、4、6、12周,差异显着（P<0.05）。Ⅰ型胶原蛋白免疫荧光强度显示:实验组Ⅰ型胶原蛋白免疫荧光强度先增强后逐渐减弱,在10周达到高峰,此时Ⅰ型胶原蛋白荧光强度要高于第2、4、6、8、12周。实验组第4周Ⅰ型胶原蛋白免疫荧光强度高于其第2周,差异明显（P<0.05）;实验组第6周Ⅰ型胶原蛋白免疫荧光强度高于其第4周,差异明显（P<0.05）;实验组第8周Ⅰ型胶原蛋白免疫荧光强度高于其第6周,差异明显（P<0.05）;实验组第10周Ⅰ型胶原蛋白免疫荧光强度高于其第8周,差异明显（P<0.05）。对照组Ⅰ型胶原蛋白免疫荧光强度高于实验组第2、4、6、8、12周,差异较大（P<0.05）。4股直肌内VEGF、BMP-2分泌量表达实验组肌组织标本VEGF分泌量呈先升高后维持一定的分泌量然后再降低。第4周达到高峰,并保持到第6周,高于第2、8、10、12周。实验组VEGF第4周分泌量多于第2周,差异明显（P<0.05）;实验组VEGF第8周分泌量低于第6周分泌量,差异明显（P<0.05）。与对照组进行比较,实验组内第2、4、6、8周分泌量高于对照组,差异明显（P<0.05）。实验组肌组织标本BMP-2分泌量呈先升高再降低趋势。6周时达到高峰,高于第2、8、10、12周。实验组BMP-2第4周分泌量高于第2周,差异较明显（P<0.05）;BMP-2第6周分泌量多于第4周,差异明显（P<0.05）;BMP-2第8周分泌量低于第6周分泌量,差异明显（P<0.05）;BMP-2第10周分泌量低于第8周,差异显着（P<0.05）;BMP-2第12周分泌量低于第10周,差异明显（P<0.05）。与对照组进行比较,实验组内第2、4、6、8周BMP-2分泌量高于对照组差异有统计学意义（P<0.05）;第10、12周实验组分泌量较对照少,两者差异有统计学意义（P<0.05）。结论1.在大段自体骨异位血管化预构骨皮瓣过程中,兔骨骼肌能分泌VEGF、BMP-2。2.VEGF、BMP-2在预构骨皮瓣早期即可发挥作用,先不断增加而后缓慢减少。3.预构骨皮瓣过程中,骨骼肌可同时促进血管生成和骨活性增加。血管化完成后有助于继续增强骨活性。
王郑钢,刘鸣江,黄新锋,肖湘君[4]（2020）在《预构复合组织瓣移植修复四肢骨及软组织缺损》文中研究说明背景:预构复合组织瓣自1973年被Bakamjjan应用于心脏修复,但是受限于技术原因一直没有得到广泛使用,国内关于预构复合组织瓣修复四肢骨的研究更是稀少。目的:分析预构复合组织瓣修复四肢骨及相应软组织缺损的效果。方法:构建四肢骨骨折合并软组织缺损新西兰兔模型（第1次手术）,造模后随机分为3组,A组造模后10 d（第2次手术）应用预构复合组织瓣修复,B组造模后10d使用游离桡骨修复,C组造模后10d再次切开伤口缝合不做其他处理。对各组兔进行一般情况、体质量、影像学及组织学观察,并进行组间对比。结果与结论:（1）各组存活率均为100%,B组中2只出现移植骨块移位,畸形愈合,对兔活动能力影响不大;（2）A组体质量恢复速率及体质量增长量均高于B组（P <0.05）;（3）影像学结果显示,A组在术后2周形成大量骨痂,4周骨痂桥节于间隙,8周缺损间隙填满,12周开始改造塑性;B组在术后2周形成少量骨痂,4周骨痂增多,股骨切断处明显,8周形成大量骨痂,12周缺损间隙填满;C组在术后8周开始形成骨痂,12周缺损间隙仍在,两端骨质硬化;（4）在第2次术后8,12周3组间Lane-Sandhu评分差异有显着性意义（P <0.05）;（5）组织学观察发现,A组术后4周出现大量新生成骨细胞和骨细胞,8周管状结构增多,新生不规则骨岛,12周新骨生成,髓腔出现,包含脂肪细胞为主的黄骨髓;B组术后4周大多数植入骨被降解和吸收,8周成骨细胞骨化,剩余的植入骨仍然可见,12周大多数成骨细胞被骨化并成为板层骨;C组术后12周缺损区充斥大量纤维结缔组织,无骨质形成;（6）提示预构复合组织瓣对四肢骨及软组织缺损具有修复作用,并且在修复速度及效果方面均优于传统的游离骨块修复。
陈琦[5]（2019）在《固定面积皮瓣成活与狭长窄蒂长宽比例关系及负压封闭引流促进狭长窄蒂皮瓣成活的动物实验与临床应用研究》文中研究表明目的:①通过制作狭长窄蒂皮瓣动物模型,瓣部固定面积,设计为直径6.0cm的圆形,蒂部长宽比例从2.0cm:0至6.0cm:2.0cm不等,观察皮瓣愈合过程、组织病理学改变和CD105、VEGF、Caspase-3、Ki67的表达情况,以进一步探讨狭长窄蒂皮瓣的成活机制;②制作狭长窄蒂皮瓣血供障碍动物模型,应用负压封闭引流技术改善狭长皮瓣血供,探讨促进狭长窄蒂皮瓣成活的方法;③狭长窄蒂皮瓣应用于临床。方法:①基础实验部分1:制作狭长窄蒂皮瓣动物模型。30只新西兰大白兔被随机分成6组,每组5只,6组皮瓣主体部分均为直径为6.0cm的圆形,其狭长窄蒂设计为不同长宽比,分别为0:2.0cm、1.0cm:2.0cm、2.0cm:2.0cm、3.0cm:2.0cm、4.0cm:2.0cm、5.0cm:2.0cm,依次命名A、B、C、D、E、F组,其中A组皮瓣的蒂部宽2.0cm,没有长度,设为对照组。在每只实验兔的背部双侧设计狭长窄蒂皮瓣。对每组皮瓣进行大体观察、皮瓣成活率测定。并于术后1小时、术后1、3、5、7天,分别切取各组皮瓣远端中部全层组织作为标本,大小为0.5cm×0.3cm,通过HE染色、组织芯片、免疫组化和酶联免疫（ELISA）、实时荧光定量PCR等技术方法,对皮瓣组织内CD105、VEGF、Caspase3、Ki67进行定性、定量分析。②基础实验部分2:制作狭长窄蒂皮瓣血供障碍动物模型,蒂部长宽值为5.0cm×2.0cm,携带直径为6cm的任意皮瓣。20只新西兰大白兔,在每只兔子的躯干一侧形成狭长窄蒂皮瓣,左右随机各半,一组术后安装负压引流装置（实验组）,一组术后常规打包（对照组）。对每组皮瓣进行大体观察,术后7天观察皮瓣成活情况,计算成活面积。并于术后3、5、7天,分别切取各组皮瓣远端中部全层组织,大小为0.5cm×0.3cm,作为标本,通过HE染色,观察不同时间皮瓣组织学变化。③临床应用部分:收集各种原因所致的皮肤软组织缺损可通过狭长窄蒂皮瓣修复的病例50例。结果:①在一定范围内增加狭长窄蒂的长宽比例,一定面积的皮瓣成活情况不受影响。但该比例达一定界限时皮瓣远端即发生坏死,成活面积缩小。②组织学分析发现,CD105、VEGF、Caspase-3、Ki67在狭长窄蒂皮瓣成活过程中,因术中组织损伤,部分血供被阻断,组织产生缺血缺氧反应,在术后含量均增加。A、B、C、D组皮瓣组织CD105、VEGF表达在术后第5天达到高峰,随着血管新生出现,组织血供改善,创伤愈合,渐下降,呈一定规律;E、F组皮瓣组织CD105、VEGF表达在术后第3天达到高峰,随后下降,与前述各组有统计学差异,呈一定规律;E、F组皮瓣组织Caspase-3表达在术后第一天上升,随后下降,Ki67在术后第一天上升,维持在高表达,与对照组均有统计学差异,呈一定规律。③负压封闭引流可促进狭长窄蒂皮瓣成活,实验侧较对照侧皮瓣肿胀、水肿程度明显减轻,血供情况较对照侧明显改善。④狭长窄蒂皮瓣是修复软组织缺损的较理想方法。结论:①一定范围内狭长窄蒂的长宽比例增加,任意皮瓣的预期成活面积不受影响,超过一定界限时,皮瓣发生坏死,成活面积小于预期成活面积;②CD105、VEGF、Caspase3、Ki67在狭长窄蒂皮瓣的成活过程中有重要作用;③负压封闭引流可促进狭长窄蒂皮瓣成活;④狭长窄蒂皮瓣是修复软组织缺损的理想方法之一。
张桦[6]（2019）在《非活化富血小板血浆对兔背部预构皮瓣再血管化的研究》文中研究表明背景:预构皮瓣（Prefabricated flap）是将知名血管移植到随意皮瓣下,或将游离皮肤移植物移植到筋膜、网膜和其他含有血管和丰富血液供应的组织中,使其成为轴型皮瓣,从而主动增加皮瓣血流量,以实现应用新的血供系统供应皮瓣的目的,为修复重建组织器官缺损提供一种新的选择。预制皮瓣的核心问题是重建血运,血运重建不足极易导致预构皮瓣坏死。因此很多学者希望通过施加一些干预手段,促进预构皮瓣的血运重建,提高其成活率。本研究通过提取兔自体非活化富血小板血浆（Platelet-rich plasma,PRP）,并于不同时间将其注射到兔背部预构皮瓣中,探讨局部应用非活化富血小板血浆对预构皮瓣存活的影响,为PRP的临床应用提供理论依据。研究目的:建立兔背部预构皮瓣动物模型,并摸索利用氧化铅混悬液灌注方法进行微血管显影的最佳浓度;探讨非活化PRP促进预构皮瓣血管新生、提高皮瓣存活面积的可行性。并比较不同时间注射非活化PRP在促进预构皮瓣存活作用上的差异。研究方法:以50只健康雄性新西兰大白兔为研究对象。首先通过两期手术构建2只以兔胸背血管束为蒂的预构皮瓣模型。分别于第一期术后7天和14天取部分皮瓣组织,通过HE染色结果确定第二期手术时间。据此构建18只兔背部预构皮瓣动物模型,根据灌注的氧化铅浓度不同分成9组,每组2只,分别经主动脉注入60%、50%、40%、37%、33%、30%、27%、23%和20%九个不同浓度的氧化铅混悬液,X光摄像观察大体标本及预构皮瓣的微血管显影效果,确定氧化铅最佳微血管显影浓度。将剩余30只兔子背部两侧构建的预构皮瓣随机分为实验侧和对照侧,共60侧。实验侧在胸背血管束周围注射自体非活化PRP,对照侧注射相同量生理盐水。按照第一期手术前（A组）、术中（B组）、术后（C组）这三个不同时间段注射非活化PRP,将30只家兔分为3组,每组10只。采用组织学、免疫组化观察、微血管密度测定和氧化铅血管造影等方法,比较不同时间注射非活化PRP的三组家兔预构皮瓣成活率及再血管化的差异。研究结果预构皮瓣构建过程中,通过HE染色观察到第一期术后两周可见较多微血管管腔形成,血运重建基本完成,此时可行第二期手术。行氧化铅混悬液灌注显影时,在60%、50%浓度下三级动脉无法显影,40%、37%浓度下三级动脉显影不清晰,33%、30%浓度下可获得清晰的三级动脉显影,其中33%浓度下造影效果最佳,而浓度低于30%时三级动脉显影模糊。与对照侧相比,非活化PRP注射侧预构皮瓣成活率、微血管密度以及VEGF、VEGFR2表达在A组和B组中均明显提高（p<0.05）。PRP治疗侧VEGFR2阳性细胞数A组提高了 2.48倍,B组提高了 2.62倍,相应的VEGF浓度同样显着提升（p<0.05）;通过CD34阳性染色的微血管计数,发现PRP处理侧A组的微血管密度提高了4倍,B组显着增加了5倍。第二期术后7天肉眼观察皮瓣外观,实验侧B组皮瓣存活率为97±2%,A组88±5.5%。C组的实验侧与对照侧相比各项指标均无显着性差异（P>0.05）。研究结论本研究分两期手术成功建立了以兔胸背血管束为蒂的预构皮瓣模型。利用浓度为33%的氧化铅混悬液进行血管造影,可以清晰地显示皮瓣微血管情况。自体非活化PRP可以促进预构皮瓣的存活,术前和术中注射均可显着提高预构皮瓣的存活率,尤其是术中注射效果更佳。本研究为临床实践中获得更大面积的预构轴型皮瓣提供了理论指导。
蔡第心[7]（2016）在《体外动态灌注OECs-DBM预血管化与受区血管融合机制研究》文中进行了进一步梳理[目的]探讨在体外通过动态灌注系统培养晚期内皮祖细胞-脱钙骨基质复合体,对晚期内皮祖细胞在脱钙骨基质上的铺展粘附、增殖、分化和基质孔隙中成管能力的影响及其可能的机制。探讨动态灌注预血管化的晚期内皮祖细胞-脱钙骨基质复合体的血管在体内与受区血管可能的融合机制。[方法]1.密度梯度离心法分离培养人外周血晚期内皮祖细胞,并通过细胞形态观察,流式细胞检测,结合凝集素及摄取乙酰化低密度脂蛋白实验和Matrigel基质胶体外成管实验对细胞进行综合鉴定。分别用10/30/50/70/100 MOI值的慢病毒介导eGFP试转染OECs,计算细胞转染效率,MTT比色法绘制不同MOI值下晚期内皮祖细胞的生长曲线,并与对照组细胞进行比较,优选出最优的MOI值,挑选耐嘌呤霉素单细胞克隆并扩增培养建立稳定细胞株,并判断其对晚期内皮祖细胞的增殖、细胞表面标记及体外成管特性有无影响。2.构建体外动态灌注培养系统,将eGFP慢病毒稳定转染晚期内皮祖细胞株接种于脱钙骨基质上,分别进行静态接种培养、动态灌注培养和抑制剂实验,通过荧光显微镜实时动态观察eGFP标记的晚期内皮祖细胞在脱钙骨基质上的铺展粘附和增殖情况,于培养第6天扫描电子显微镜下观察细胞在脱钙骨基质孔隙中的体外成管情况,RT-PCR及Western blot检测分析不同培养条件下的细胞CD34、VEGFR-1、VEGFR-2、VE-cadherin、Tie2和VEGF的mRNA及蛋白表达水平。3.建立裸鼠背部血管化动态观察窗模型,结合尾静脉注射德克萨斯红标记的右旋糖酐标记血浆,光镜及荧光显微镜下观察微血管,比较单纯观察窗模型及其结合德克萨斯红标记的右旋糖酐在微血管观察中的优劣势,并记录微血管开始显影时间,最佳观测时间及显影持续时间。往裸鼠背部血管化动态观察窗中植入静态培养和动态灌注培养的OECs-DBM支架,分别在植入后第1、3、5、7、9、12天荧光显微镜下动态观察并计数支架边缘长入血管数量,计算支架边缘及中心区荧光累积光密度值来反映支架获得的血液灌注量。在植入后第12天切取支架及其周围组织进行硬组织切片HE染色,在光镜及荧光显微镜下观察支架上荧光细胞的分布及其与受体血管融合情况。[结果]1.晚期血管内皮祖细胞表现为典型的鹅卵石样形态,能较为特异的结合凝集素及摄取乙酰化低密度脂蛋白,在Matrigel基质胶上可形成血管管腔样结构,流式细胞仪检测显示其表达细胞表面标记CD34和VEGFR-2,基本不表达CD133。当MOI=50时,慢病毒介导的eGFP转染晚期内皮祖细胞转染效率较高且对细胞生长增殖无影响,筛选出的eGFP-OECs稳定转染细胞株在荧光显微镜下发出明亮稳定的绿色荧光,细胞的生物学形状及功能保持稳定。2.与静态培养组相比较,动态灌注组脱钙骨基质上的细胞密度和细胞投射面积更大,扫描电镜观察显示动态灌注培养组在脱钙骨基质孔隙中形成三维血管腔样结构的数量多于静态培养组。RT-PCR及Western blot检测显示,与静态培养组相比,动态灌注培养组细胞CD34 mRNA表达及蛋白合成下调,内皮细胞标记VEGFR-1、VEGFR-2、VE-cadherin和Tie2mRNA表达及蛋白合成上调。抑制剂实验显示PI3K和mTOR抑制剂能够抑制流体剪切应力促进细胞铺展粘附、增殖、分化和体外成管的作用。3.成功构建裸鼠背部血管化观察窗模型。与单纯观察窗模型相比,其结合德克萨斯红标记的右旋糖酐在微血管观察中更为精确。OECs-DBM支架边缘新长入血管计数结果显示两组支架植入后周围都有微血管长入,随着培养时间的延长,长入的微血管数量增多。在支架植入后第3、5、7天,动态灌注组的新长入血管数目较静态培养组多。动态灌注组的长入血管数量上升速率较静态灌注组快。动态灌注组支架边缘区域的荧光累积光密度值在所有观察时间点均高于静态培养组支架,而两组的支架中心区荧光累积光密度值差异更为显着。硬组织切片HE染色显示两组支架外均未见绿色荧光细胞。[结论]通过动态灌注系统给予脱钙骨基质上晚期内皮祖细胞持续不断的流体剪切应力,能够经由PI3K/Akt/mTOR信号传导通路促进晚期内皮祖细胞在脱钙骨基质上的铺展粘附、增殖、向成熟内皮细胞分化和基质孔隙中三维成管的能力,促进脱钙骨基质体外预血管化。与静态培养组相比,体外动态灌注培养预血管化的OECs-DBM支架能以长入式融合的方式与受区血管融合,更快更充分的获得受区的血液灌注,研究成果可能用于促进组织工程产品的临床应用。
张海峰[8]（2016）在《3D打印PLA-HA复合材料生物相容性及构建组织工程骨的实验研究》文中研究指明目的:探讨以骨髓基质细胞作为种子细胞与3D打印PLA-HA复合支架材料的生物相容性;观察3D打印PLA-HA复合材料体内成骨性能,为进一步在临床修复大段骨缺损奠定理论基础。方法:将绿色荧光蛋白标记的骨髓基质细胞分别与3D打印PLA-HA复合材料以及β-TCP进行体外复合培养,采用荧光显微镜、扫描电镜、CCK8法以及碱性磷酸酶活性测定法检测细胞的生长黏附、增殖力及碱性磷酸酶活性的变化;选择新西兰兔的胫骨内侧构建体内生物反应器模型。实验分为两组:实验组包括骨髓基质细胞、3D打印PLA-HA复合材料、骨膜以及隐血管束;对照组包括骨髓基质细胞、3D打印PLA-HA复合材料、骨膜。待取材后,采取聚合酶链式反应、显微CT检测法、HE染色分别行骨分化相关基因、骨形态计量分析和组织学观察和检测。结果:3D打印PLA-HA复合材料在12h时的细胞粘附率可达到60%以上;其细胞增殖量在第4天和第7天与β-TCP组相比有统计学差异;在复合培养的第3天,第7天和第14天其ALP含量与对照组相比具有统计学差异,且在第7天时其ALP活性较β-TCP组高。体内实验结果表明,实验组OPN及COLⅠ的相对表达量较对照组多;显微CT扫描结果显示,实验组新生骨组织体积及骨小梁相对数目较对照组高;组织学观察结果显示,实验组有新生骨组织形成,部分新生骨组织为编织骨,骨细胞体积大,数量多,新生血管密度较多;对照组可见部分新生骨样组织形成,骨细胞分化较成熟。结论:3D打印PLA-HA复合材料具有良好的生物相容性,可作为骨组织工程的支架材料;3D打印PLA-HA复合支架材料符合构建功能相对完善的组织工程骨的要求。
王宇翀[9]（2014）在《预构人工皮瓣修复战创伤复杂性创面的实验研究》文中研究指明【研究背景】在战争与自然灾害条件下对各种战创伤所遗留的大面积皮肤软组织缺损创面的修复，特别是对血管、神经及骨骼等深部组织暴露或有胸腹壁大面积洞穿性缺损的特殊创面修复一直是战创伤救治中较难解决的问题。【研究目的】利用组织工程皮肤联合自体组织移植技术将人工真皮与预构皮瓣技术相结合修复肌腱、骨骼外露的深部创面，为治疗战创伤复杂性创面提供一种新的方法。【研究方法】选取健康S-D大鼠105只，雄性，鼠龄为68周,体重为150-200g，首先取25只标记编号后，随机分成A、B、C、D、E五组（A组为人工真皮预构皮瓣组，B组为传统预构皮瓣组，C组为人工真皮皮下直接修复组，D组为人工真皮筋膜下直接修复组，E组为植皮组）。A组在右腹壁按照右腿部设计的创面大小进行取皮，制备同样大小的人工真皮覆盖于腹壁筋膜组织创面上方，将皮片修薄后回植于人工真皮表面。28天后，沿预构好的筋膜皮瓣切开，筋膜皮瓣完整掀起后断离周围，仅保留腹壁浅动、静脉作为蒂部的筋膜瓣。在大鼠右足踝关节处制作肌腱、骨骼外露的创面，在右腿创面和右腹部皮下进行钝性分离形成皮下隧道。将制备好的筋膜瓣从隧道通过，完整包裹于腿部创面缝合固定。B组不放置人工真皮，其余和A组完全相同。C组制作右腿创面，右腹壁按照右腿部创面大小进行取皮。切开腹壁筋膜皮瓣形成带蒂筋膜瓣后通过皮下隧道缝合固定，在其上方置入同样大小的人工真皮，最后在人工真皮上方植皮。D组制作右腿创面，右腹壁按照右腿部创面大小进行取皮。将制备好的人工真皮放置于腿部创面上方，切开腹壁筋膜皮瓣形成带蒂筋膜瓣后通过皮下隧道缝合固定，上方植皮修复创面。E组制作右腿创面，腹壁取皮后修薄植于创面上方。各组术毕均用无菌纱布、自粘绷带于功能位包扎腿部伤口，无菌纱布、绷带包扎腹壁伤口，佩戴大鼠保护套。每组最后一次手术术后第28天分别通过大体观察、人工皮瓣观察，愈合良好的组再每组以同样方法做40只，通过活动度观察、肿胀度观察、组织学观察、影像学观察等方法进行测定。【研究结果】1、人工皮瓣大体观察结果：术后第28天，A组、B组大鼠右腿创面均已愈合，C组、D组、E组创面均未愈合，对A组、B组进行测量对比。2、双腿活动度观察：测量A组、B组术后第28天足踝关节活动度，采用t检验，结果示A组左侧和右侧、B组左侧和右侧、A组和B组的左侧、A组和B组的右侧四种比较的差异均无统计学意义（P＞0.05）。3、双腿肿胀度观察：测量A组、B组术后各时间点大鼠双侧足踝关节处周长，统计结果采用t检验，结果示A组术前和术后第7天，术后第7天和术后第14天，术后第14天和术后第21天，术后第21天和术后第28天统计结果的差异均有统计学意义（P＜0.05），术前和术后第28天的统计结果差异无统计学意义（P＞0.05）。B组术前和术后第7天，术后第7天和术后第14天，术后第14天和术后第21天，术后第21天和术后第28天统计结果的差异均有统计学意义（P＜0.05），术前和术后第28天的统计结果差异无统计学意义（P＞0.05）。A组和B组之间术前、术后第7天、术后第14天、术后第21天、术后第28天的统计结果差异无统计学意义（P＞0.05）。4、组织学检查：测量A组、B组术后各时间点CD31+免疫组化阳性累计光密度值（IOD），各组间IOD值比较采用t检验，结果示术后第7天和术后第14天，术后第14天和术后第21天统计结果的差异均有统计学意义（P＜0.05），术后第21天和术后第28天统计结果差异无统计学意义（P＞0.05）。测量A组、B组术后第28天Masson染色切片组织厚度，组间比较采用t检验，结果示术后第28天A组和B组皮瓣切片厚度统计结果的差异有统计学意义（P＜0.05）。5、影像学检查：A组、B组大鼠于术后第28天行预构皮瓣微血管造影X光机摄片，可见造影剂灌入股血管、腹壁浅血管及其分支，A组和B组的两侧腿部均无明显差异，说明术后第28天手术干预的腿部已经和正常腿部的血供非常相似。而A组的手术干预侧相比B组组织更厚，整个皮瓣造影亮度也更亮，说明皮瓣内有许多微小的血管形成，优于B组的血管灌注。【研究结论】1、运用人工真皮皮下直接修复的方法、人工真皮筋膜下直接修复的方法和植皮直接修复的方法修复大鼠足踝关节骨骼、肌腱外露的创面，在术后第28天创面不能完全愈合；运用人工真皮预构皮瓣的方法和传统预构皮瓣的方法修复大鼠足踝关节骨骼、肌腱外露的创面，在术后第28天创面可以完全愈合。2、预构人工皮瓣在皮瓣大体观察、双腿活动度、双腿肿胀度中都与传统预构皮瓣无明显差异，在影像学观察比较中皮瓣血液灌注优于传统预构皮瓣，在皮瓣厚度的观察比较中显着厚于传统预构皮瓣。
胡君玲[10]（2014）在《自体富血小板血浆对兔预构皮瓣再血管化作用的实验研究》文中进行了进一步梳理本研究通过提取动物自身全血,制备成富血小板血浆（Platelet-rich Plasma,PRP）。在兔腹部两侧各构建一个股动静脉血管束预构腹部皮瓣,将制备好的PRP应用于其中任意一侧的皮瓣,另一侧应用等量生理盐水,探讨局部应用PRP对预构皮瓣存活的影响,深入了解自身来源的富血小板血浆（PRP）在皮瓣转移过程中的作用,进一步探讨PRP影响预构皮瓣生长的作用原理,为PRP的临床应用提供理论依据。在20只健康雄性新西兰大白兔腹部两侧构建股动静脉血管束预构皮瓣共40侧,随机分成实验侧和对照侧各20侧。实验侧向预构股血管束周围注射实验前1天预先制备好的自体PRP,对照侧注射等量生理盐水。按照随机数字表法将20只兔分成4组,每组5只。分别于1期术后7d（A组）、14d（B组）取实验兔预构皮瓣组织行组织学观察、免疫组化观察和血管密度测定,并在1期术后14d行2期手术,即沿原预构皮瓣标记线掀起以植入的股血管束为蒂的岛状皮瓣后原位缝合,于2期术后7d进行皮瓣存活率检测,并分别于2期术后7d（C组）14d（D组）取预构皮瓣组织行组织学观察、免疫组化观察和血管密度测定,比较各个时间组实验侧与对照侧预构皮瓣成活情况的差异是否存在统计学意义,并初步探讨其成活机理。2期术后7d,实验侧与对照侧皮瓣存活率分别为（76.60±8.91）%、（64.75±6.49）%,P<0.05。A组、B组、C组、D组4组实验侧新生血管密度分别为（10.78±1.07）、（12.86±1.18）、（17.42±0.84）、（18.44±0.87）,与对照侧（7.22±0.84）、（9.36±0.88）、（15.02±1.04）、（16.04±1.39）比较,均有统计学意义（P<0.05）,并且随着时间的发展,B组较A组,C组较B组,实验侧和对照侧新生血管密度增长均显着（P<0.05）,但D组较C组增长不显着（P>0.05）。1、建立了一个简便、稳定的兔股血管束预构腹部皮瓣模型：2、自体PRP可以促进预构皮瓣的血管新生,提高皮瓣存活率。
二、预构血管化神经的动物模型的建立（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、预构血管化神经的动物模型的建立（论文提纲范文）
（1）皮瓣实验动物模型的研究进展（论文提纲范文）
| 1 皮瓣模型的实验动物选择 |
| 1.1 啮齿类 |
| 1.2 小型猪 |
| 1.3 其他动物 |
| 2 不同皮瓣类型的动物模型 |
| 2.1 随意型皮瓣模型 |
| 2.2 穿支皮瓣模型 |
| 2.2.1 一般穿支皮瓣 |
| 2.2.2 跨区穿支皮瓣观察模型 |
| 2.3 肌瓣和肌皮瓣模型 |
| 2.4 骨肌皮瓣模型 |
| 2.5 其他皮瓣动物模型 |
| 2.5.1 逆行岛状皮瓣 |
| 2.5.2 预构皮瓣动物模型 |
| 3 讨论与展望 |
（2）血管灌注量及位置对动脉化静脉皮瓣的早期成活的机制研究及临床应用（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 参考文献 |
| 第一部分 血管灌注量对动脉化静脉皮瓣早期成活及代谢影响的实验研究 |
| 一、材料和方法 |
| 二、结果 |
| 三、结论 |
| 四、讨论 |
| 参考文献 |
| 第二部分 血管灌入位置对动脉化静脉皮瓣早期成活及代谢影响的实验研究 |
| 一、材料及方法 |
| 二、结果 |
| 三、结论 |
| 四、讨论 |
| 参考文献 |
| 第三部分 改善血管灌注量及位置对提高动脉化静脉皮瓣早期成活的初步临床应用研究 |
| 一、手术方法 |
| 二、典型病例 |
| 三、讨论 |
| 参考文献 |
| 总结 |
| 综述一 静脉皮瓣研究进展 |
| 参考文献 |
| 综述二 动脉化静脉皮瓣的临床应用 |
| 参考文献 |
| 综述三 四肢皮肤软组织缺损修复的皮瓣选择 |
| 参考文献 |
| 攻读博士期间公开发表的论文 |
| 致谢 |
（3）兔骨骼肌对大段自体骨异位预构血管化骨皮瓣的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 1 材料和方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
| 附图 |
| 参考文献 |
| 综述 预构组织皮瓣的研究进展 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间发表文章情况 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（4）预构复合组织瓣移植修复四肢骨及软组织缺损（论文提纲范文）
| 文章快速阅读： |
| 文题释义： |
| 0引言Introduction |
| 1 材料和方法Materials and methods |
| 1.1 设计 |
| 1.2 时间及地点 |
| 1.3 材料 |
| 1.4 方法 |
| 1.4.1 动物模型建立及处理方法 |
| 1.5 主要观察指标 |
| 1.5.1 一般情况观察 |
| 1.5.2 预构组织瓣情况观察 |
| 1.6 统计学分析 |
| 2 结果Results |
| 2.1 实验动物数量分析 |
| 2.2 一般情况 |
| 2.3 体质量变化 |
| 2.4 影像学评价 |
| 2.5 组织学结果 |
| 3 讨论Discussion |
（5）固定面积皮瓣成活与狭长窄蒂长宽比例关系及负压封闭引流促进狭长窄蒂皮瓣成活的动物实验与临床应用研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 序言 |
| 参考文献 |
| 研究内容、研究方法 |
| 第一部分: 固定面积皮瓣成活与狭长窄蒂长宽比例关系动物实验研究 |
| 第二部分: 负压封闭引流促进狭长窄蒂皮瓣成活的实验研究 |
| 第三部分: 狭长窄蒂皮瓣的临床应用研究 |
| 实验材料 |
| 第一部分 固定面积皮瓣成活与狭长窄蒂长宽比例关系动物实验研究 |
| 一、实验分组与皮瓣设计 |
| 二、实验方法与步骤 |
| 三、实验结果 |
| 四、实验总结 |
| 第二部分 负压封闭引流促进狭长窄蒂皮瓣成活 |
| 一、实验分组及皮瓣设计 |
| 二、实验方法与步骤 |
| 三、实验结果 |
| 四、实验总结 |
| 第三部分 狭长窄蒂任意皮瓣临床应用研究 |
| 一、病例资料 |
| 二、手术方法 |
| 三、结果 |
| 四、典型病例 |
| 五、第三部分总结 |
| 讨论 |
| 实验结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 攻读博士学位期间发表的学术论文及科研成果 |
| 中英文对照缩略词表 |
| 致谢 |
（6）非活化富血小板血浆对兔背部预构皮瓣再血管化的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩写 |
| 前言 |
| 第一部分兔预构皮瓣模型的建立及氧化铅微血管造影方法的研究 |
| 一、前言 |
| 二、材料 |
| 三、方法 |
| 四、结果 |
| 五、讨论 |
| 第二部分 非活化PRP的制备 |
| 一、前言 |
| 二、材料 |
| 三、方法 |
| 四、结果 |
| 五、讨论 |
| 第三部分不同注射时间非活化富血小板血浆对兔预构皮瓣成活的影响 |
| 一、前言 |
| 二、材料 |
| 三、方法 |
| 四、结果 |
| 五、讨论 |
| 全文总结 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（7）体外动态灌注OECs-DBM预血管化与受区血管融合机制研究（论文提纲范文）
| 缩略词表 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 第一部分 人外周血来源晚期血管内皮祖细胞的分离、培养、鉴定及慢病毒介导的eGFP稳定转染细胞株的建立 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 第二部分 体外动态灌注培养晚期内皮祖细胞促进脱钙骨基质血管化及其机制的实验研究 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 第三部分 体外预血管化OECs-DBM支架的血管与受区血管融合的实时动态观察与机制研究 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间获得的学术成果 |
| 致谢 |
（8）3D打印PLA-HA复合材料生物相容性及构建组织工程骨的实验研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 缩略词表 |
| 绪论 |
| 第一章 3D打印PLA-HA复合材料与骨髓基质细胞的生物相容性研究 |
| 1 引言 |
| 2 材料和方法 |
| 2.1 主要仪器和试剂材料 |
| 2.2 试剂配制 |
| 2.2.1 DMEM培养基的配制 |
| 2.2.2 磷酸盐缓冲液的配制 |
| 2.2.3 细胞冻存液的配制 |
| 2.2.4 成骨诱导液的配制 |
| 2.3 制备3D打印PLA-HA复合材料 |
| 2.4 骨髓基质细胞的分离和培养 |
| 2.4.1 兔骨髓的获取 |
| 2.4.2 原代培养 |
| 2.4.3 兔BMSC的体外培养 |
| 2.5 慢病毒转染BMSC |
| 2.6 GFP标记的BMSC与材料复合 |
| 2.7 BMSC与材料复合培养观察 |
| 2.7.1 光学显微镜观察细胞与材料复合情况 |
| 2.7.2 扫描电镜观察 |
| 2.8 BMSC在材料内的黏附能力的检测 |
| 2.9 BMSC在材料内的增殖能力的检测 |
| 2.10 碱性磷酸酶活性的检测 |
| 2.11 统计方法 |
| 3 结果 |
| 3.1 光学显微镜观察BMSC |
| 3.2 GFP标记的BMSC与材料复合培养 |
| 3.3 扫描电镜观察BMSC在材料内部的黏附情况 |
| 3.4 BMSC在材料内的黏附率测定 |
| 3.5 BMSC在材料内的增殖力测定 |
| 3.6 ALP活力定量测定 |
| 4 讨论 |
| 5 本章结论 |
| 第二章 3D打印PLA-HA复合材料在体内构建组织工程骨的实验研究 |
| 1 引言 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 主要仪器和试剂材料 |
| 2.2 试剂配制 |
| 2.2.1 DMEM培养基的配制 |
| 2.2.2 磷酸盐缓冲液的配制 |
| 2.2.3 细胞冻存液的配制 |
| 2.2.4 EDTA脱钙液的配制 |
| 2.3 制备3D打印PLA-HA复合材料 |
| 2.4 骨髓基质细胞的分离和培养 |
| 2.4.1 兔骨髓的获取 |
| 2.4.2 原代培养 |
| 2.4.3 兔BMSC的体外培养 |
| 2.5 BMSC与3D打印PLA-HA材料复合 |
| 2.6 BMSC与材料复合培养观察 |
| 2.6.1 光学显微镜观察细胞与材料复合情况 |
| 2.6.2 扫描电镜观察 |
| 2.7 实验动物分组及体内生物反应器动物模型的建立 |
| 2.8 指标检测 |
| 2.8.1 一般情况及大体观察 |
| 2.8.2 成骨分化相关基因检测 |
| 2.8.2.1 RNA提取(TRIzol Reagent提取法) |
| 2.8.2.2 逆转录cDNA第一链 |
| 2.8.2.3 普通PCR |
| 2.8.2.4 实时定量PCR |
| 2.8.3 显微CT三维重建及分析 |
| 2.8.4 组织学检测 |
| 2.8.4.1 HE染色 |
| 2.8.4.2 Masson染色 |
| 2.9 统计方法 |
| 3 结果 |
| 3.1体外复合培养实验 |
| 3.1.1 兔BMSC的体外培养 |
| 3.1.2 扫描电镜观察 |
| 3.2 体内植入 |
| 3.2.1 大体观察 |
| 3.2.2 细胞OPN及 COLⅠ的表达检测 |
| 3.2.3 Micro CT三维重建结果 |
| 3.2.4 组织学观察 |
| 3.2.4.1 HE染色结果 |
| 3.2.4.2 Masson染色结果 |
| 4 讨论 |
| 5 本章结论 |
| 参考文献 |
| 全文总结 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 攻读硕士学位期间发表的文章 |
| 参加会议 |
（9）预构人工皮瓣修复战创伤复杂性创面的实验研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩略词表 |
| 前言 |
| 第一部分 预构皮瓣修复复杂性创面的初步研究 |
| 一、实验材料 |
| 二、实验方法 |
| 三、结果 |
| 四、讨论 |
| 第二部分 人工真皮预构皮瓣和传统预构皮瓣修复效果的比较研究 |
| 一、实验材料 |
| 二、实验方法 |
| 三、结果 |
| 四、讨论 |
| 全文总结 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
（10）自体富血小板血浆对兔预构皮瓣再血管化作用的实验研究（论文提纲范文）
| 英文缩写一览表 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 目录 |
| Table of Contents |
| 第一章 前言 |
| 第二章 实验材料和实验方法 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.1.1 实验动物 |
| 2.1.2 实验试剂 |
| 2.1.3 实验仪器 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 实验动物与分组 |
| 2.2.2 PRP制备活化 |
| 2.2.3 动物模型制备 |
| 2.2.4 实验步骤 |
| 2.2.5 标本采集与处理 |
| 2.3 观察指标及检测方法 |
| 2.3.1 皮瓣肉眼观察 |
| 2.3.2 皮瓣存活率测定 |
| 2.3.3 病理组织学检测 |
| 第三章 实验结果 |
| 3.1 PRP制备和血小板浓度测定 |
| 3.2 大体观察及皮瓣存活率的检测 |
| 3.3 组织学检测 |
| 3.4 皮瓣毛细血管密度检测 |
| 3.4.1 免疫组化测定VEGF表达 |
| 3.4.2 CD34免疫组化测定血管密度 |
| 结论 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
四、预构血管化神经的动物模型的建立（论文参考文献）
- [1]皮瓣实验动物模型的研究进展[J]. 顾依然,朱仔燕,李春霖,邓国英. 中国比较医学杂志, 2021(08)
- [2]血管灌注量及位置对动脉化静脉皮瓣的早期成活的机制研究及临床应用[D]. 文根. 苏州大学, 2020(06)
- [3]兔骨骼肌对大段自体骨异位预构血管化骨皮瓣的影响[D]. 陈达. 新乡医学院, 2020(12)
- [4]预构复合组织瓣移植修复四肢骨及软组织缺损[J]. 王郑钢,刘鸣江,黄新锋,肖湘君. 中国组织工程研究, 2020(26)
- [5]固定面积皮瓣成活与狭长窄蒂长宽比例关系及负压封闭引流促进狭长窄蒂皮瓣成活的动物实验与临床应用研究[D]. 陈琦. 苏州大学, 2019(04)
- [6]非活化富血小板血浆对兔背部预构皮瓣再血管化的研究[D]. 张桦. 北京协和医学院, 2019(02)
- [7]体外动态灌注OECs-DBM预血管化与受区血管融合机制研究[D]. 蔡第心. 昆明医科大学, 2016(01)
- [8]3D打印PLA-HA复合材料生物相容性及构建组织工程骨的实验研究[D]. 张海峰. 上海交通大学, 2016(03)
- [9]预构人工皮瓣修复战创伤复杂性创面的实验研究[D]. 王宇翀. 第二军医大学, 2014(04)
- [10]自体富血小板血浆对兔预构皮瓣再血管化作用的实验研究[D]. 胡君玲. 厦门大学, 2014(09)